线粒体绿色荧光探针,如Mito-Tracker Green或MitoTracker Green FM,是一种常用于生物医学研究中的工具,主要用于活细胞线粒体的特异性荧光染色。
一、产品特点
1.细胞膜渗透性:线粒体绿色荧光探针具有细胞膜渗透性,能够轻松进入细胞内部。
2.特异性染色:探针在线粒体内特异性富集,并发出绿色荧光,实现对线粒体的精准标记。
3.不依赖于线粒体膜电位:与某些传统探针不同,线粒体绿色荧光探针对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位,因此在多种实验条件下均能保持稳定的染色效果。
二、光谱特性
1.激发波长:通常为490nm左右(具体可能因不同产品略有差异)。
2.发射波长:在516nm至523nm之间(具体取决于产品型号和实验条件)。
三、使用方法
1.溶解与储存:
(1)探针通常以粉末形式提供,使用前需用细胞培养级别的DMSO或其他适宜溶剂溶解至一定浓度(如1mM),并分装避光保存。
(2)储存条件一般为-20℃,避光,有效期可达2年。
2.细胞染色:
(1)将细胞与适当浓度的探针工作液(如20-200nM)孵育一定时间(如15-45分钟),使探针进入细胞并富集于线粒体。
(2)染色结束后,更换新鲜预热的培养基或缓冲液,以去除未结合的探针。
3.观察与分析:
(1)使用荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等设备观察细胞,记录线粒体的绿色荧光信号。
四、注意事项
1.探针浓度和工作液体积应根据实验需求和细胞类型进行调整。
2.染色后应尽快进行观察和分析,避免荧光信号减弱或消退。
3.探针不适用于醛类固定液固定后的细胞和组织,因为固定会导致荧光信号丢失。
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